1. Hi-C推荐测序深度为多少?
一般互作、TAD、区室层级分析推荐100X,因为测序深度越高,分辨率越高。根据人、小鼠等项目经验,150X的测序数据量可支持10Kb分辨率下的loop分析,对于其他物种,建议根据基因组大小和项目目标咨询技术人员。
2. 染色质层级结构以及其特点有哪些?
(1)Compartment A/B (区室,常染色质/异染色质);
(2)TAD(拓扑结构域):区室中作用最为频繁的单元。边界具有保守性,富含CTCF结合位点、活跃转录标记;
(3)LAD(层关联域):区室中作用较弱的单位,主要由转录沉默染色质组成,富含异染色质组蛋白H3K27/9me3;
(4)Loops(染色质环):TAD中互作频率高于周围区域,比如启动子-增强子结构;Loops层级结构更精细,能够达到调控元件结合/基因层面。