三代全长转录组是指通过长度长测序技术直接对完整的mRNA进行测序,可以克服传统二代转录组Unigene拼接较短、转录本结构不完整的缺陷,从而获得包含5’UTR、3’UTR、poyA尾巴的转录本全长序列及完整结构信息。
应用场景
(1)完善转录本,侧重可变剪接;辅助基因组注释
(2)筛选不同环境下的差异表达基因或转录本
(3)差异动态转录组;比较转录组
技术路线

三代全长转录组优势
1. 长读长(平均读长10-15K),可一次将真核生物的全长转录本信息读取完整;
2. 无需进行片段打断和拼接,避免出现组装错误;
3. 基于全长转录组测序得到的完整准确的转录本信息,结合二代数据,方便识别特异性表达且做更加精确的基因和转录本表达定量。
4. 针对有参考基因组的物种,全长转录组信息可以纠正基因组的错误组装、更准确地发现新的转录本和基因、分析基因融合事件等。
5. 无需链特异性建库,全长转录组测序可直接获取正义链、反义链及部分LncRNA信息